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AG亚游集团PC端最全的液相色谱柱学问分享和选择技

来源:未知  发布时间:2018-05-20 02:29

  AG亚游集团官网手机版家喻户晓,现代高效液相色谱阐发中,色谱柱的选择间接影响了分手结果的黑白,选择合适的色谱柱能够缩短方式开辟所需的时间,而且使方式更具不变性。可是现正在市场上色谱柱品种繁多,分歧类型的色谱柱分手对象分歧,因而,要做合适的选择,必需对此有必然的认识和领会。

  柱长,内径,如250*4.6mm。一般柱长正在2250mm,柱越长,分手度越高,但柱压更高,分手所需时间更长;但分手度取理论塔板数的平方根成反比,所以一昧添加柱长并不是最无效的分手手段,一般环境下,150mm、5um的填料能够供给脚够的塔板数。

  粒径,影响色谱分手度。粒径越。?质衷娇,柱效越高,但柱压力越高,柱容易被污染,导致柱寿命降低。常见阐发柱凡是利用5um填料,复杂的多组分样品分手一般利用3.5um粒径,更大内径的制备色谱柱凡是利用更大的粒径。若是固定相选择是准确,可是分手度不敷,那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比不异前提下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3.5um的色谱柱的背压倒是5um的2倍,因而若何选择填料粒径需要按照现实环境而定。

  孔径,60A,120A,300A等。孔径。?蚝?茁矢,比概况积大,载碳量高;色谱柱填料孔径大小需和大小相婚配,进出填料孔并取孔内概况的键合相进行分手分派,凡是要求孔径曲径曲直径的3倍以上,一般小利用80120A,大利用300A。

  颗粒外形,一般有球形和犯警则形,当利用黏度较大的流动相时,球形颗粒能够降低柱压,耽误色谱柱寿命。

  比概况积,指的是每克填料的概况积,如180m2/g350m2/g,取粒度和含孔率相关;比概况积大,会添加样品取键合相之间的反映,添加保留和分手度;比概况积小则能够缩短阐发时间和均衡时间,并不是比概况积大或者小就更好,需要选择合适的比概况积。

  硅胶基质:最通用的基质,强度大,化学润色容易,但利用的pH值范畴无限(一般为28,特殊润色的能够达到112)。

  聚合物基质:多为聚苯乙烯二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化学不变,使用pH范畴宽,具有更强的疏水性,对卵白质等样品分手结果较好;但强度较。?藁?芗量赡艿贾戮酆衔锶芩醵?芩,批次反复性较差,商品化色谱柱不多,一般价钱较贵。

  键合相:键合试剂分歧,对化合物的选择性分歧,一般长链的烷基键合相(C18 C8)比短链的(C4 C3)不变;非极性的键合比拟极性的键合相(-NH2)不变。

  封端:用短链将裸露的硅羟基键合后封锁起来,以削减残留的硅醇基,减轻待测组分取酸性硅羟基反映而惹起的色谱峰拖尾现象。特别对于极性样品而言,未封端处置的色谱柱分手结果较差。

  长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,阐发时间也越长。250300mm是最遍及的柱长,尝试室一半以上的工做都是采用此规格柱子,一般用来分手l0到50个组份的中等至复杂夹杂物;500600mm,要求较高分辩率的使用,般用来分手大于50个组份或包含有难分手物质的复杂样品法式升温阐发。

  内径:柱效率取柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也添加,答应进样量就越多。当进样量跨越柱容量时,则因柱内每块理论板内不克不及成立实正的均衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辩率降低,沉现性欠好。因而对于复杂样品需要切确分手,必需利用小内径柱子。另一方面若样品中存正在具有很不不异浓度组份化合物,为了添加样品容量就必需利用内径大的柱子,目前尝试室利用最常见的柱子内径一般是4.6mm。

  一般选择准绳:阐发大量化合物选择大孔径色谱柱;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,耽误色谱柱利用寿命等。

  现正在商品化的液相色谱柱琳琅满目,按照色谱柱的参数能够给我们供给一个初步的选择,但因为各个仪器厂商的填料手艺和键合手艺都有差别,即便都是C18柱,统一品牌分歧系列都有分歧的功能,有能耐受低pH值的、有耐高温的、有适合碱性样品的等等。所以正在选择色谱柱前要好好研究色谱柱参数,细心阅读色谱柱仿单,才能找到合适的色谱柱和适宜的分手方式。

  仪器市场产物参差不齐,那每款产物的选择就得尤为慎沉。从产物参数到利用方式再到功能比力需要沉视的细节良多。只要分析的考虑多方面要素,最终才能够选出最适合尝试室使用的液相色谱。

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